嘔吐毒素的檢測(cè)方法與作用機(jī)制

^{脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又稱嘔吐毒素(vomitoxin)，主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。}



 

^{DON的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)，據(jù)報(bào)道也有其它一些鐮刀菌可產(chǎn)生 。DON于1972年由日本的Morooka等分離，同年，Yoshizawa等闡明了這種新的真菌毒素的結(jié)構(gòu)，并將其命名為4-deoxynivalenol(DON) 。}

 

^{DON廣泛存在于，主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物，也污染糧食制品，人和動(dòng)物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。另外，它還常與其它的霉鹵毒素如黃曲mei毒素共同污染農(nóng)作物，進(jìn)入人體后可以相互影響。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)DON可能與人類食管癌、IGA腎bing有關(guān)，對(duì)人類及動(dòng)物的健康構(gòu)成威脅。DON屬于劇毒或中等毒物，研究表明，DON在體內(nèi)可能有一定的蓄積，但無(wú)特殊的靶器官，具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性。人畜攝入了被DON污染的食物／飼料后，會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀，嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡，但不同的動(dòng)物對(duì)DON的敏感程度不一，豬是敏感的動(dòng)物。研究表明，DON可能對(duì)免疫系統(tǒng)有影響，有明顯胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遺傳毒性，但無(wú)致癌、致突變作用。由于DON的危害嚴(yán)重，引起了各國(guó)的普遍重視。}



 

^{有調(diào)查顯示：}

 

^{中國(guó)飼料和原料霉菌毒素污染超標(biāo)的比例為60%—70%，其中嘔吐毒素的超標(biāo)比例接近70%，被檢的玉米、麩皮和DDGS樣品中嘔吐毒素的檢出率均高達(dá)90%以上，分別為92.9%、92.3%和100%。}

 

^{豆粕的檢出率較低為54.5%。}

 

^{麩皮和豆粕中嘔吐毒素未見超標(biāo)，其平均含量為0.44mg/kg和0.05mg/kg，屬于輕度污染。}

 

^{玉米嘔吐毒素的超標(biāo)率為57.1%，毒素平均含量為1.01mg/kg，其中*含量為2.13mg/kg，屬于中度污染。}

 

^{DDGS中嘔吐毒素的超標(biāo)率為88.2%，毒素平均含量為1.36mg/kg，低含量為0.85mg/kg，*含量為1.72mg/kg，屬于中度污染。}

 

^{玉米和DDGS中嘔吐毒素的平均含量極顯著高于麩皮和豆粕（P＜0.01），DDGS中嘔吐毒素的平均含量顯著高于玉米（P＜0.05），麩皮中嘔吐毒素的平局你含量極顯著高于豆粕（P＜0.01）。}

 

^{被檢配合飼料中嘔吐毒素的檢出率為97.4%，仔豬料、中豬料、妊娠母豬料和哺乳母豬料的檢出率高達(dá)100%。}

 

^{其中，乳豬料嘔吐毒素未見超標(biāo)，其平均含量為0.28mg/kg，顯著低于其他種類全價(jià)料（P＜0.05），屬于輕度污染。仔豬料、中豬料、大豬料、妊娠豬料和哺乳豬料均有不同程度的超標(biāo)，超標(biāo)率為14.3%、14.3%、22.2%、10.0%和23.1%，其*含量分別為2.31、1.14、1.44、1.45mg/kg和1.52mg/kg，屬于中度污染。}

 

^{“嘔吐毒素”不怕高溫126℃下加熱90分鐘仍有毒性。}

 

^{蠟樣芽孢桿菌是一種在顯微鏡下看起來(lái)形狀像蠟一樣的革蘭染色陽(yáng)性桿菌，在自然界廣泛存在，是引起食物中毒的常見細(xì)菌，與臭名昭著的炭疽桿菌是“同族兄弟”。}

 

^{蠟樣芽孢桿菌很狡猾，在生長(zhǎng)條件不好的情況下會(huì)產(chǎn)生一種被稱為“芽孢”的“外殼”，把自己保護(hù)起來(lái)，避免死亡。因此，蠟樣芽孢桿菌比其它細(xì)菌更耐熱，常常在加熱的條件下也不會(huì)死亡。}

 

^{上世紀(jì)70年代以前，人們并未注意到蠟樣芽孢桿菌對(duì)人類健康的影響，以為只是一種自然界常見的非致病菌。但實(shí)際上，早在1937年就有人從病人的血液中分離到了這種細(xì)菌；上世紀(jì)50年代，挪威醫(yī)生首先報(bào)告了蠟樣芽孢桿菌引起的4起食物中毒事件，涉及600多人。后來(lái)，英國(guó)、日本、印度、澳大利亞、美國(guó)等地相繼發(fā)現(xiàn)蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒，我國(guó)于1973年報(bào)道蠟樣芽孢桿菌相關(guān)病例。近年來(lái)，蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒事件逐漸增多。據(jù)統(tǒng)計(jì)，1986年-2007年僅在我國(guó)文獻(xiàn)報(bào)道中的蠟樣芽孢桿菌食物中毒事件就有299起，甚至有導(dǎo)致死亡的病例發(fā)生。}

 

^{“米”家族易被盯上}

 

^{蠟樣芽孢桿菌釋放何種毒素與細(xì)菌的類型和生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。有研究證實(shí)，血清1型蠟樣芽孢桿菌容易釋放嘔吐毒素；在米飯等淀粉類食物中，蠟樣芽孢桿菌容易產(chǎn)生嘔吐毒素，而在肉類等其它食品中，嘔吐毒素產(chǎn)生較少，而腸毒素增多。}



 

^{一般來(lái)說(shuō)，壞了的食品總是有異味，大家聞一聞就知道能不能吃，但蠟樣芽孢桿菌“放毒”特別隱蔽，含有毒素的食品大多無(wú)腐*、變質(zhì)現(xiàn)象，進(jìn)食時(shí)不易被人們察覺。蠟樣芽孢桿菌食物中毒主要發(fā)生在夏季，在我國(guó)主要發(fā)生在6-9月。食物中毒的臨床表現(xiàn)有兩種類型：嘔吐型和腹瀉型。我國(guó)以嘔吐型多見，約占蠟樣芽孢桿菌食物中毒的76%，而歐美等西方國(guó)家以腹瀉型多見。這可能與我國(guó)的飲食結(jié)構(gòu)有關(guān)。}

 

^{嘔吐型的蠟樣芽孢桿菌食物中毒潛伏期短，一般在進(jìn)食后0.5-6小時(shí)發(fā)生，主要表現(xiàn)為惡心、嘔吐，伴有乏力、低熱等癥狀，很少出現(xiàn)腹瀉。大多數(shù)病情較輕，24小時(shí)內(nèi)可以自愈，但嚴(yán)重的可能引起肝衰竭、代謝性酸中毒、心肌或中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害，甚至導(dǎo)致死亡。引起嘔吐型食物中毒的主要食品是米飯及其制品(80%以上)，如：米飯、炒飯、稀飯、米糕、米粉皮、米線等；涼面、豆腐也可以引發(fā)。}

 

^{腹瀉型食物中毒較少見，中毒的原因是蠟樣芽孢桿菌腸毒素。潛伏期較長(zhǎng)，一般在進(jìn)食后6-15小時(shí)發(fā)生，臨床表現(xiàn)主要是水樣腹瀉和腹痛，很少伴有嘔吐癥狀。大多數(shù)在腹瀉數(shù)次后癥狀逐漸減輕，1天左右好轉(zhuǎn)。嚴(yán)重者可引起電解質(zhì)紊亂、出血性腹瀉。引起腹瀉型食物中毒的食品較復(fù)雜，糧食、肉類、乳類食品均可引發(fā)，其中盒飯類混合食品較多見，可能是在分裝的過程中污染所致。}

 

^{嘔吐毒素檢測(cè)方法：}

 

^{1、膠體金定性卡法：}

^{是嘔吐毒素簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法，檢測(cè)不需要配套儀器，樣品處理簡(jiǎn)單，五到十分鐘就可以看到檢測(cè)結(jié)果?？梢愿鶕?jù)G、T線，初步確定所測(cè)樣本毒素含量范圍，但不能給出具體數(shù)值。價(jià)*低、沒有國(guó)標(biāo)支持，適合企業(yè)初檢使用。}



 

^{2、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法：}

^{依據(jù)該方法開發(fā)出來(lái)的嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒，可以半定量的檢測(cè)樣品中嘔吐毒素的含量，目前國(guó)產(chǎn)試劑盒大量上市，價(jià)*}適中，有國(guó)標(biāo)支持，適合中小型企業(yè)質(zhì)量控制，或者作為產(chǎn)品初步質(zhì)量控制。



 

^{3、免疫親和柱為分離手段：用液相色譜儀作為檢測(cè)工具的分析方法。該項(xiàng)技術(shù)靈敏度高，測(cè)定范圍廣泛，采用單克隆免疫技術(shù)，可以性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來(lái)，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強(qiáng)，有國(guó)標(biāo)支持。檢測(cè)成本高，儀器維護(hù)成本高。一般作為檢測(cè)機(jī)構(gòu)終端判定方法，也有大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制方法。}



 

^{4、膠體金定量分析卡法：是深圳市芬析儀器制造有限公司推出的光譜掃描吸峰方法，靈敏度高、結(jié)果可靠，可以和親和柱方法相媲美，檢測(cè)價(jià)*適中；有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)支持。適合中大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制。}



 

^{5、液相或氣相串聯(lián)質(zhì)譜法：一般作為實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法，主要作為研究或者國(guó)家部門對(duì)毒素情況監(jiān)測(cè)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。}